Reflektometryczna ingerencja spektroskopia - Reflectometric interference spectroscopy
Reflektometryczna spektroskopii zakłócenia (RIF) jest metodą fizyczną na podstawie zakłóceń białego światła w cienkiej folii, którą stosuje się w celu zbadania oddziaływania cząsteczkowe.
Zasada
Podstawową zasadą pomiaru odpowiada na interferometru Michelsona .
Realizacja
Białe światło jest skierowane pionowo na układzie wielu warstw o SiO 2 , wysokim współczynniku załamania Ta 2 O 5 oraz dodatkowy SiO 2 warstwy (ta dodatkowa warstwa może być chemicznie modyfikowana). Częściowe wiązki światła białego są widoczne na każdej granicy faz, a następnie załamuje (transmitowane). Te odbite promienie częściowe nakładanie co powoduje zakłócenia w widmie, który jest wykrywany za pomocą spektrofotometru z układem diodowym.
Poprzez modyfikację chemiczną górna SiO 2 warstwy zmienia się w taki sposób, aby umożliwić współdziałanie z cząsteczkami docelowymi. To oddziaływanie powoduje zmianę grubości warstwy fizycznej d i współczynniku załamanian w tej warstwie. Produkt określa się zarówno grubość optyczną tej warstwy: n • d.
Zmiana w optycznym grubość powoduje modulacji widma zakłócenia. Monitorowanie tej zmiany na przestrzeni czasu pozwala obserwować zachowanie wiązania cząsteczek docelowych.
Podanie
RIF jest stosowany zwłaszcza jako metody wykrywania, na chemio- i biosensory .
Chemosensory nadają się do pomiarów w trudnych warunkach i w fazie gazowej. Jako wrażliwe warstwy, przeważnie nieselektywne polimery pomiarowe stosuje się sortowanie, które analitów według wielkości (tak zwany efekt sita molekularnego przy użyciu polimerów mikroporowatych) lub w zależności od polaryzacji (na przykład grupy funkcyjne polidimetylosiloksany ). Przy wykonywaniu pomiarów nieselektywnych sygnał sumy z kilku analitów zmierzono co oznacza, że wieloczynnikowa analizy danych, takich jak sieci neuronowe być stosowane do oznaczania ilościowego. Jednakże, jest także możliwe stosowanie polimerów selektywnie pomiarowego tak zwane cząsteczkowych polimerów Naniesione (MCI), które sztuczne elementy rozpoznania.
W przypadku korzystania z biosensory , polimery , takie jak glikole polietylenowe lub dekstrany nanosi się układu warstw, a na elementach ujmowania biocząsteczki są unieruchomione. Zasadniczo, dowolna cząsteczka może być stosowany jako element uznanie (białek, takich jak przeciwciała , DNA / RNA, takie jak aptamery , małe cząsteczki organiczne, takie jak estron , ale także lipidy , takie jak fosfolipidy błon).
RIF, jak SPR jest techniką etykieta wolne, co pozwala na obserwację czasowo-rozdzielczej interakcji między partnerami wiązania bez użycia fluorescencji lub etykiet radioaktywnych.
Literatura
- G. Gauglitz, A. Brecht, G. Kraus i W. Nahm. Czujnik. Actuat. B Chem. 11, 1993
- A. Jung. Analny. Bioanal. Chem. 372 1, 2002
- F. Gesellchen B. Zimmermann FW Herberg. Methods in Molecular Biology, 2005
- T. Nagel E. Ehrentreich-Forster, M. Singh i in. Czujniki i siłowniki B-chemiczny 129 2, 2008
- P. Fechner F. Pröllem M. Carlquist G. Proll. Analny. Bioanal. Chem. 01 listopada 2008