Elektroforeza hemoglobiny - Hemoglobin electrophoresis
Elektroforeza hemoglobiny to badanie krwi, które może wykryć różne rodzaje hemoglobiny . Test może wykryć hemoglobiny S, postać związanego z anemią sierpowatą , jak i innych rodzajów hemoglobiny nieprawidłowych, takich jak hemoglobiny C . Może być również stosowany do badania talasemii , które są zaburzeniami spowodowanymi wadliwą produkcją hemoglobiny.
Procedura
Test wykorzystuje zasady elektroforezy żelowej w celu oddzielenia różnych rodzajów hemoglobiny i jest rodzajem natywnej elektroforezy żelowej . Po obróbce próbki w celu uwolnienia hemoglobiny z krwinek czerwonych, jest ona wprowadzana do porowatego żelu (zazwyczaj wykonanego z agarozy lub octanu celulozy ) i poddawana działaniu pola elektrycznego , najczęściej w środowisku alkalicznym . Różne hemoglobiny mają różne ładunki i zgodnie z tymi ładunkami poruszają się z różnymi prędkościami w żelu i ostatecznie tworzą dyskretne pasma (patrz wzorce migracji elektroforetycznej ). Kontroli jakości próbki zawierającej hemoglobin A, F, S i C są prowadzone wraz z próbką pacjenta w celu pomocy w identyfikacji poszczególnych zespołów. Względne ilości każdego rodzaju hemoglobiny można oszacować przez pomiar gęstości optycznej pasm, chociaż ta metoda nie jest wiarygodna w przypadku hemoglobin występujących w małych ilościach.
Ponieważ hemoglobiny wykazują różne wzorce migracji w zależności od poziomu pH , badanie tej samej próbki zarówno przy pH kwasowym, jak i zasadowym może pomóc w identyfikacji niektórych nieprawidłowych hemoglobin, które w innym przypadku byłyby niemożliwe do odróżnienia od innych.
Znaczenie kliniczne
Krew dorosłego człowieka zwykle zawiera trzy rodzaje hemoglobiny: hemoglobinę A , która stanowi około 95% całości; Stężenie hemoglobiny 2 , co stanowi mniej niż 3,5%; i niewielką ilość hemoglobiny F . Jeśli obecne są nieprawidłowe warianty hemoglobiny, takie jak hemoglobina S (która występuje w niedokrwistości sierpowatokrwinkowej ), C lub E , pojawią się jako nieoczekiwane prążki w elektroforezie (pod warunkiem, że nie migrują do tego samego miejsca, co inne hemoglobiny).
Elektroforeza hemoglobiny może być również wykorzystywana do badania talasemii , które są spowodowane zmniejszoną produkcją podjednostek cząsteczki hemoglobiny. Hemoglobina 2 poziomy są zazwyczaj zwiększone w beta-talasemię drobnych i hemoglobiny F może być nieznacznie zwiększony. W beta-talasemii major hemoglobina A jest obniżona (lub w niektórych przypadkach nieobecna), a hemoglobina F jest znacznie podwyższona; A 2 poziomy są zmienne. W chorobie hemoglobiny H , postaci talasemii alfa , można wykryć nieprawidłowe pasmo hemoglobiny H , a czasami pasmo hemoglobiny Barts ; ale w przypadku łagodniejszej cechy alfa-talasemii wyniki elektroforezy są w rzeczywistości normalne.
Historia
Linusowi Paulingowi przypisuje się wynalezienie elektroforezy hemoglobiny w 1949 roku. Nowsze alternatywy dla konwencjonalnej elektroforezy hemoglobiny obejmują ogniskowanie izoelektryczne , elektroforezę stref kapilarnych i wysokosprawną chromatografię cieczową .