Bezpośrednie przeciwciało fluorescencyjne - Direct fluorescent antibody
Bezpośredniej immunofluorescencji ( DFA lub DFA ), znany również jako „ bezpośredniej immunofluorescencji ”, jest przeciwciało, które zostało oznaczone w teście bezpośredniego przeciwciała fluorescencyjnego . Jego nazwa wywodzi się z faktu, że bezpośrednio testuje obecność antygenu ze znakowanym przeciwciałem , w przeciwieństwie do metody western blot , która wykorzystuje pośrednią metodę wykrywania, w której pierwotne przeciwciało wiąże docelowy antygen, z drugorzędowym przeciwciałem skierowanym przeciwko pierwszorzędowemu, i znacznik przyłączony do przeciwciała drugorzędowego.
Dostępne są komercyjne zestawy testowe DFA, które zawierają przeciwciała znakowane fluorescencyjnie , przeznaczone do specyficznego kierowania na unikalne antygeny obecne w bakterii lub wirusie, ale nieobecne u ssaków ( Eukariota ). Technika ta może być wykorzystana do szybkiego określenia, czy osobnik ma określoną infekcję wirusową lub bakteryjną.
W przypadku wirusów układu oddechowego, z których wiele ma podobne szerokie objawy, wykrywanie można przeprowadzić przy użyciu próbek popłuczyn z nosa od podmiotu z podejrzeniem zakażenia. Chociaż można uzyskać wydalanie komórek w drogach oddechowych, często występuje ich niewielka liczba, dlatego można zastosować alternatywną metodę, w której kompatybilną hodowlę komórkową można wystawić na zakażone próbki popłuczyn z nosa, więc jeśli wirus jest obecny, można go wyhodować do większej ilości, co może dać wyraźniejszy odczyt dodatni lub ujemny.
Podobnie jak w przypadku wszystkich rodzajów mikroskopii fluorescencyjnej , należy określić prawidłową długość fali absorpcji , aby wzbudzić znacznik fluoroforowy przyłączony do przeciwciała i wykryć wydzielaną fluorescencję, która wskazuje, które komórki są dodatnie na obecność wirusa lub bakterii wykryto.
Immunofluorescencję bezpośrednią można wykorzystać do wykrywania złogów immunoglobulin i białek dopełniających w biopsjach skóry, nerek i innych narządów. Ich obecność wskazuje na chorobę autoimmunologiczną . Kiedy bada się skórę nie wystawioną na działanie słońca, pozytywny bezpośredni IF (tak zwany test zespołu tocznia ) jest dowodem tocznia rumieniowatego układowego . Bezpośrednie przeciwciało fluorescencyjne można również zastosować do wykrywania infekcji pasożytniczych, jak to było pionierem Sadun i in. (1960).
Zobacz też
Bibliografia
Linki zewnętrzne
- Technika Direct + Fluorescent + Antibody + Technique w US National Library of Medicine Medical Subject Headings (MeSH)