Aminokwas -Amino acid

Struktura generycznego L-aminokwasu w postaci „obojętnej” potrzebna do zdefiniowania nazwy systematycznej, bez sugerowania, że ​​postać ta faktycznie istnieje w wykrywalnych ilościach w roztworze wodnym lub w stanie stałym.

Aminokwasy to związki organiczne zawierające aminokwasy ( −NH+3) i grupy funkcyjne kwasu karboksylowego ( -CO2H ) , wraz z łańcuchem bocznym ( grupa R ) specyficznym dla każdego aminokwasu. Pierwiastki obecne w każdym aminokwasie to węgiel (C), wodór (H), tlen ( O ) i azot (N) ( CHON ); dodatkowo siarka (S) jest obecna w łańcuchach bocznych cysteiny i metioniny , a selen (Se) w mniej powszechnym aminokwasie selenocysteinie. Wiadomo, że ponad 500 naturalnie występujących aminokwasów stanowi monomerowe jednostki peptydów , w tym białek , od 2020 r., chociaż tylko 22 występują w kodzie genetycznym , z których 20 ma własne wyznaczone kodony, a 2 z nich mają specjalne mechanizmy kodowania: Selenocysteina , która jest obecny we wszystkich eukariontach i pirolizynie , która jest obecna u niektórych prokariontów .

Aminokwasy zostały formalnie nazwane przez Wspólną Komisję IUPAC-IUBMB ds. Nomenklatury Biochemicznej w kategoriach fikcyjnej „neutralnej” struktury pokazanej na ilustracji. Na przykład systematyczną nazwą alaniny jest kwas 2-aminopropanowy, oparty na wzorze CH3 - CH (NH2 )-COOH . Komisja uzasadniła to podejście w następujący sposób:

Podane nazwy systematyczne i wzory odnoszą się do postaci hipotetycznych, w których grupy aminowe są nieprotonowane, a grupy karboksylowe niedysocjowane. Konwencja ta jest użyteczna w celu uniknięcia różnych problemów nomenklaturowych, ale nie powinna sugerować, że te struktury stanowią znaczną część cząsteczek aminokwasów.

Można je sklasyfikować według lokalizacji podstawowych strukturalnych grup funkcyjnych, jako aminokwasy alfa- (α-) , beta- (β-) , gamma- (γ-) lub delta- (δ-) ; inne kategorie dotyczą polarności , jonizacji i typu grup łańcucha bocznego ( alifatyczne , acykliczne , aromatyczne , zawierające hydroksyl lub siarkę , itp.). Reszty aminokwasowe w postaci białek tworzą drugi co do wielkości składnik ( woda jest największym) mięśni ludzkich i innych tkanek . Oprócz roli reszt w białkach, aminokwasy uczestniczą w wielu procesach, takich jak transport neuroprzekaźników i biosynteza .

Historia

Pierwsze kilka aminokwasów odkryto na początku XIX wieku. W 1806 roku francuscy chemicy Louis-Nicolas Vauquelin i Pierre Jean Robiquet wyizolowali ze szparagów związek , który później nazwano asparaginą , pierwszym odkrytym aminokwasem. Cystyna została odkryta w 1810 roku, chociaż jej monomer, cysteina , pozostawała nieodkryta do 1884 roku . Glicynę i leucynę odkryto w 1820 roku . aminokwasów i ustalono minimalne dzienne zapotrzebowanie wszystkich aminokwasów dla optymalnego wzrostu.

Jedność kategorii chemicznej uznał Wurtz w 1865 roku, ale nie nadał jej żadnej szczególnej nazwy. Pierwsze użycie terminu „aminokwas” w języku angielskim pochodzi z 1898 roku, podczas gdy niemiecki termin Aminosäure był używany wcześniej. Stwierdzono, że białka po trawieniu enzymatycznym lub hydrolizie kwasowej wydzielają aminokwasy . W 1902 Emil Fischer i Franz Hofmeister niezależnie zaproponowali, że białka są tworzone z wielu aminokwasów, w wyniku czego powstają wiązania między grupą aminową jednego aminokwasu a grupą karboksylową innego, co skutkuje liniową strukturą, którą Fischer nazwał „ peptydem ”.

Struktura ogólna

21 proteinogennych α-aminokwasów występujących u eukariontów , pogrupowanych według wartości pKa łańcuchów bocznych i ładunków przenoszonych w fizjologicznym pH (7,4)

W strukturze pokazanej na górze strony R reprezentuje łańcuch boczny specyficzny dla każdego aminokwasu. Atom węgla obok grupy karboksylowej nazywany jest α–węglem . Aminokwasy zawierające grupę aminową związaną bezpośrednio z węglem α określane są jako α-aminokwasy . Należą do nich prolina i hydroksyprolina , które są aminami drugorzędowymi . W przeszłości często nazywano je iminokwasami , co jest mylącą nazwą, ponieważ nie zawierają grupy iminowej HN=C . Przestarzały termin pozostaje częsty.

Izomeria

Powszechnie występujące naturalne formy aminokwasów mają budowę −NH+3( −NH+2 w przypadku proliny) oraz −CO2grupy funkcyjne przyłączone do tego samego atomu C, a zatem są α-aminokwasami. Z wyjątkiem achiralnej glicyny, naturalne aminokwasy mają konfigurację L i są jedynymi występującymi w białkach podczas translacji w rybosomach.

Konwencja L i D dla konfiguracji aminokwasów nie odnosi się do aktywności optycznej samego aminokwasu, ale raczej do aktywności optycznej izomeru aldehydu glicerynowego , z którego teoretycznie ten aminokwas może być syntetyzowany ( aldehyd D- glicerynowy jest prawoskrętny; Aldehyd L -glicerynowy jest lewoskrętny).

Alternatywną konwencją jest użycie desygnatorów ( S ) i ( R ) do określenia konfiguracji bezwzględnej . Prawie wszystkie aminokwasy w białkach znajdują się ( S ) na węglu α, przy czym cysteina jest ( R ), a glicyna niechiralna . Cysteina ma swój łańcuch boczny w tym samym położeniu geometrycznym, co inne aminokwasy, ale terminologia R / S jest odwrócona, ponieważ siarka ma wyższą liczbę atomową w porównaniu z tlenem karboksylowym, co nadaje łańcuchowi bocznemu wyższy priorytet według Cahn-Ingold-Prelog zasady sekwencji , podczas gdy atomy w większości innych łańcuchów bocznych dają im niższy priorytet w porównaniu z grupą karboksylową.

Reszty D -aminokwasowe znajdują się w niektórych białkach, ale są one rzadkie.

Łańcuchy boczne

Aminokwasy są oznaczane jako α-, gdy aminowy atom azotu jest przyłączony do węgla α, atomu węgla sąsiadującego z grupą karboksylanową.

We wszystkich przypadkach poniżej w tej sekcji wartości (jeśli występują) odnoszą się do jonizacji grup jako reszt aminokwasowych w białkach. Nie są to wartości dla wolnych aminokwasów (które mają niewielkie znaczenie biochemiczne).

Alifatyczne łańcuchy boczne

Struktura L -proliny

Kilka łańcuchów bocznych zawiera tylko H i C i nie ulega jonizacji. Są to następujące (z trzy- i jednoliterowymi symbolami w nawiasach):

  • Glicyna (Gly, G): H−
  • Alanina (Ala, A): CH 3
  • Walina (Val, V): (CH 3 ) 2 CH−
  • Leucyna (Leu, L): (CH 3 ) 2 CHCH 2
  • Izoleucyna (Ile, I): CH 3 CH 2 CH (CH 3 )
  • Prolina (Pro, P): −CH 2 CH 2 CH 2 cyklizowana na aminie

Polarne neutralne łańcuchy boczne

Dwa aminokwasy zawierają łańcuchy boczne alkoholu. W normalnych warunkach nie ulegają one jonizacji, chociaż jedna, seryna, ulega deprotonacji podczas katalizy przez proteazy serynowe : jest to przykład poważnych zaburzeń i nie jest ogólnie charakterystyczny dla reszt seryny.

  • Serine (Ser, S, nie, gdy nie jest poważnie zaniepokojony): HOCH 2
  • Treonina (Thr, T, no ): CH 3 CHOH-

Treonina ma dwa centra chiralne, nie tylko centrum chiralne L (2 S ) na węglu α, wspólne dla wszystkich aminokwasów oprócz achiralnej glicyny, ale także (3 R ) na węglu β. Pełna specyfikacja stereochemiczna to L -treonina ( 2S , 3R ).

amidowe łańcuchy boczne

Dwa aminokwasy mają amidowe łańcuchy boczne, jak następuje:

Te łańcuchy boczne nie jonizują się w normalnym zakresie pH.

Łańcuchy boczne zawierające siarkę

Dwa łańcuchy boczne zawierają atomy siarki, z których jeden jonizuje w normalnym zakresie (ze wskazanym), a drugi nie:

  • Cysteina (Cys, C, ): HSCH 2
  • Metionina (Met, M, no ): CH 3 SCH 2 CH 2

Aromatyczne łańcuchy boczne

Łańcuchy boczne fenyloalaniny (po lewej), tyrozyny (w środku) i tryptofanu (po prawej)

Jak zilustrowano, trzy aminokwasy mają aromatyczne struktury pierścieniowe jako łańcuchy boczne. Spośród nich tyrozyna jonizuje w normalnym zakresie; pozostałe dwa nie).

  • Fenyloalanina (Phe, F, no ): po lewej na ilustracji
  • Tyrozyna (Tyr, Y, ): środek ilustracji
  • Tryptofan (Trp, W, no ): tuż na ilustracji

Anionowe łańcuchy boczne

Dwa aminokwasy mają łańcuchy boczne, które przy zwykłym pH są anionami. Aminokwasy te są często określane jako kwasy karboksylowe, ale są bardziej poprawnie nazywane karboksylanami, ponieważ są deprotonowane przy najbardziej odpowiednich wartościach pH. Anionowe grupy karboksylanowe zachowują się jak zasady Brønsteda we wszystkich okolicznościach, z wyjątkiem enzymów, takich jak pepsyna , które działają w środowiskach o bardzo niskim pH, takich jak żołądek ssaka.

  • Asparaginian („kwas asparaginowy”, Asp, D, ): - O 2 CCH 2
  • Glutaminian ("kwas glutaminowy", Glu, E, ): - O 2 CCH 2 CH 2

Kationowe łańcuchy boczne

Łańcuchy boczne histydyny (po lewej), lizyny (w środku) i argininy (po prawej)

Istnieją trzy aminokwasy z łańcuchami bocznymi, które są kationami w obojętnym pH (chociaż w jednym występują obie postacie histydyna, kationowa i obojętna). Są one powszechnie nazywane aminokwasami zasadowymi , ale termin ten jest mylący: histydyna może działać zarówno jako kwas Brønsteda, jak i jako zasada Brønsteda w obojętnym pH, lizyna działa jak kwas Brønsteda, a arginina ma ustalony ładunek dodatni i nie jonizuje się w neutralne warunki. Nazwy histidinium, lysinium i argininium byłyby dokładniejszymi nazwami struktur, ale zasadniczo nie mają żadnej waluty.

  • Histydyna (His, H, ): Protonowane i zdeprotonowane formy w równowadze są pokazane po lewej stronie obrazu
  • Lizyna (Lys, K, ): Pokazana w środku obrazu
  • Arginina (Arg, R, ): Pokazana po prawej stronie obrazka

β- i γ-aminokwasy

Aminokwasy o strukturze NH+3−CXY−CXY−CO2, takie jak β-alanina , składnik karnozyny i kilka innych peptydów, to β-aminokwasy. Te o strukturze NH+3−CXY−CXY−CXY−CO2są γ-aminokwasami i tak dalej, gdzie X i Y to dwa podstawniki (z których jednym jest zwykle H).

Zwitterions

Jonizacja i charakter Brønsteda N-końcowej aminowej, C-końcowej karboksylanu i bocznych łańcuchów reszt aminokwasowych

W roztworze wodnym aminokwasy o umiarkowanym pH występują jako jony obojnacze , tj. jako jony dipolarne z obydwoma NH+3i CO2w stanach naładowanych, więc ogólna struktura to NH+3−CHR−CO2. W fizjologicznym pH tak zwane „formy neutralne” −NH 2 −CHR−CO 2 H nie są obecne w żadnym możliwym do zmierzenia stopniu. Chociaż dwa ładunki w rzeczywistej strukturze sumują się do zera, mylące i błędne jest nazywanie gatunku o zerowym ładunku netto „nienaładowanym”.

Przy bardzo niskim pH (poniżej 3) grupa karboksylanowa ulega protonowaniu, a struktura staje się kwasem amoniokarboksylowym, NH+3−CHR − CO2H . Odnosi się to do enzymów, takich jak pepsyna, które są aktywne w środowiskach kwaśnych, takich jak żołądek ssaków i lizosomy , ale nie ma istotnego zastosowania do enzymów wewnątrzkomórkowych. Przy bardzo wysokim pH (powyżej 10, normalnie niespotykanym w warunkach fizjologicznych), grupa amonowa jest deprotonowana, dając NH2 - CHR -CO2.

Chociaż w chemii stosuje się różne definicje kwasów i zasad, jedyną użyteczną w chemii w roztworze wodnym jest definicja Brønsteda : kwas to rodzaj, który może przekazać proton innemu gatunkowi, a zasada to taka, która może przyjąć proton. To kryterium jest używane do oznaczenia grup na powyższej ilustracji. Zauważ, że asparaginian i glutaminian są głównymi grupami, które działają jak zasady Brønsteda, a powszechne odniesienia do nich jako do aminokwasów kwasowych (wraz z C-końcem) są całkowicie błędne i mylące. Podobnie, tak zwane aminokwasy zasadowe obejmują jeden (histydynę), który działa zarówno jako kwas Brønsteda, jak i zasada, jeden (lizyna), który działa głównie jako kwas Brønsteda i jeden (arginina), który jest normalnie nieistotny dla zachowania kwasowo-zasadowego ponieważ ma stały ładunek dodatni. Ponadto w zwykłej klasyfikacji zwykle zapomina się o tyrozynie i cysteinie, które działają głównie jako kwasy przy neutralnym pH.

Punkt izoelektryczny

Złożenie krzywych miareczkowania dwudziestu aminokwasów proteinogennych pogrupowanych według kategorii łańcucha bocznego

W przypadku aminokwasów z nienaładowanymi łańcuchami bocznymi jon obojnaczy przeważa przy wartościach pH pomiędzy dwiema wartościami pKa , ale współistnieje w równowadze z małymi ilościami netto jonów ujemnych i netto dodatnich. W punkcie środkowym między dwiema wartościami p Ka , śladowa ilość jonów ujemnych netto i ślady jonów dodatnich netto bilansują się, tak że średni ładunek netto wszystkich obecnych form wynosi zero. To pH jest znane jako punkt izoelektryczny p I , więc p I =1/2(p Ka1 + p Ka2 ) .

W przypadku aminokwasów z naładowanymi łańcuchami bocznymi zaangażowana jest pKa łańcucha bocznego . Tak więc w przypadku asparaginianu lub glutaminianu z ujemnymi łańcuchami bocznymi końcowa grupa aminowa jest zasadniczo całkowicie naładowana w postaci NH+3, ale ten dodatni ładunek musi być zrównoważony przez stan, w którym tylko jedna C-końcowa grupa karboksylanowa jest naładowana ujemnie. Dzieje się to w połowie drogi między dwiema wartościami p K a karboksylanów : p I =1/2(p Ka1 + p Ka (R) ) , gdzie p Ka (R) jest łańcuchem bocznym p Ka .

Podobne rozważania dotyczą innych aminokwasów z jonizowalnymi łańcuchami bocznymi, w tym nie tylko glutaminianu (podobnego do asparaginianu), ale także cysteiny, histydyny, lizyny, tyrozyny i argininy z dodatnimi łańcuchami bocznymi

Aminokwasy mają zerową ruchliwość w elektroforezie w punkcie izoelektrycznym, chociaż to zachowanie jest częściej wykorzystywane w przypadku peptydów i białek niż pojedynczych aminokwasów. Jony obojnacze mają minimalną rozpuszczalność w punkcie izoelektrycznym, a niektóre aminokwasy (w szczególności z niepolarnymi łańcuchami bocznymi) można wyizolować przez wytrącanie z wody przez dostosowanie pH do wymaganego punktu izoelektrycznego.

Właściwości fizykochemiczne aminokwasów

Ok. 20 aminokwasów kanonicznych można sklasyfikować według ich właściwości. Ważnymi czynnikami są ładunek, hydrofilowość lub hydrofobowość , wielkość i grupy funkcyjne. Właściwości te wpływają na strukturę białek i interakcje białko-białko . Białka rozpuszczalne w wodzie mają tendencję do tego, aby ich reszty hydrofobowe ( Leu , Ile , Val , Phe i Trp ) były zakopane w środku białka, podczas gdy hydrofilowe łańcuchy boczne są wystawione na działanie rozpuszczalnika wodnego. (Zauważ, że w biochemii reszta odnosi się do określonego monomeru w łańcuchu polimerycznym polisacharydu , białka lub kwasu nukleinowego .) Integralne białka błonowe mają tendencję do posiadania zewnętrznych pierścieni odsłoniętych hydrofobowych aminokwasów, które zakotwiczają je w podwójnej warstwie lipidowej . Niektóre białka błon obwodowych mają na swojej powierzchni plaster hydrofobowych aminokwasów, który blokuje się na błonie. W podobny sposób białka, które muszą wiązać się z dodatnio naładowanymi cząsteczkami, mają powierzchnie bogate w ujemnie naładowane aminokwasy, takie jak glutaminian i asparaginian , podczas gdy białka wiążące się z ujemnie naładowanymi cząsteczkami mają powierzchnie bogate w dodatnio naładowane łańcuchy, takie jak lizyna i arginina . Na przykład lizyna i arginina są wysoce wzbogacone w regiony białek wiążących kwasy nukleinowe o niskiej złożoności . Istnieją różne skale hydrofobowości reszt aminokwasowych.

Niektóre aminokwasy mają specjalne właściwości, takie jak cysteina, która może tworzyć kowalencyjne wiązania dwusiarczkowe z innymi resztami cysteinowymi, prolina , która tworzy cykl w szkielecie polipeptydowym oraz glicyna, która jest bardziej elastyczna niż inne aminokwasy.

Ponadto glicyna i prolina są wysoce wzbogacone w regionach białek eukariotycznych i prokariotycznych o niskiej złożoności, podczas gdy w przypadku wysoce reaktywnych lub złożonych lub hydrofobowych aminokwasów, takich jak cysteina, fenyloalanina, tryptofan, metionina zaobserwowano odwrotną sytuację (niedostatecznie reprezentowaną). , walina, leucyna, izoleucyna.

Wiele białek przechodzi szereg modyfikacji potranslacyjnych , w których dodatkowe grupy chemiczne są przyłączane do łańcuchów bocznych aminokwasów. Niektóre modyfikacje mogą wytwarzać hydrofobowe lipoproteiny lub hydrofilowe glikoproteiny . Ten rodzaj modyfikacji umożliwia odwracalne kierowanie białka na błonę. Na przykład, dodawanie i usuwanie kwasu palmitynowego kwasu tłuszczowego do reszt cysteinowych w niektórych białkach sygnalizacyjnych powoduje, że białka przyłączają się, a następnie odłączają od błon komórkowych.

Tabela standardowych skrótów i właściwości aminokwasów

Chociaż w tabeli znajdują się symbole jednoliterowe, IUPAC-IUBMB zaleca, aby „Użycie symboli jednoliterowych było ograniczone do porównania długich sekwencji”.

Aminokwas Symbole 3- i 1-literowe Łańcuch boczny
Wskaźnik hydropatii
Molarna chłonność Masa cząsteczkowa Obfitość
białka (%)
Standardowe kodowanie genetyczne,
notacja IUPAC
3 1 Klasa Biegunowość Ładunek netto
przy pH 7,4
Długość fali,
λ max (nm)
Współczynnik ε
(mM -1 ·cm -1 )
Alanina Ala A Alifatyczny Niepolarny Neutralny 1,8 89,094 8.76 GCN
Arginina Arg R Stały kation Podstawowy polarny Pozytywny −4,5 174,203 5,78 MGR, CGY
Asparagina Asn N Amid Polarny Neutralny −3,5 132,119 3,93 AAY
Asparaginian Żmija D Anion Baza Brønsted Negatywny −3,5 133.104 5.49 GAY
Cysteina Cys C Tiol Kwas Brønsteda Neutralny 2,5 250 0,3 121,154 1,38 UGY
Glutamina Gln Q Amid Polarny Neutralny −3,5 146,146 3,9 SAMOCHÓD
Glutaminian Glu mi Anion Baza Brønsted Negatywny −3,5 147.131 6,32 GAR
Glicyna Gly G Alifatyczny Niepolarny Neutralny -0,4 75.067 7.03 GGN
Histydyna Jego H Kation aromatyczny Kwas i zasada Brønsteda Pozytywny, 10%
Neutralny, 90%
-3,2 211 5,9 155,156 2.26 RAFA KORALOWA
Izoleucyna Ile I Alifatyczny Niepolarny Neutralny 4,5 131,175 5.49 AUH
Leucyna Leja L Alifatyczny Niepolarny Neutralny 3,8 131,175 9.68 YUR, CUY
Lizyna Lys K Kation Kwas Brønsteda Pozytywny -3,9 146,189 5.19 AAR
Metionina Spotkał M Tioeter Niepolarny Neutralny 1,9 149.208 2,32 SIE
Fenyloalanina Phe F Aromatyczny Niepolarny Neutralny 2,8 257, 206, 188 0,2, 9,3, 60,0 165,192 3,87 UUY
Prolina Zawodowiec P Cykliczny Niepolarny Neutralny -1,6 115,132 5.02 CCN
Serine Ser S Hydroksylowy Polarny Neutralny −0.8 105.093 7.14 UCN, AGY
Treonina Th T Hydroksylowy Polarny Neutralny -0,7 119,119 5,53 ACN
Tryptofan Trp W Aromatyczny Niepolarny Neutralny -0,9 280, 219 5,6, 47,0 204.228 1,25 UGG
Tyrozyna Tyr Tak Aromatyczny Kwas Brønsteda Neutralny -1,3 274, 222, 193 1,4, 8,0, 48,0 181.191 2,91 UAY
Walina Val V Alifatyczny Niepolarny Neutralny 4.2 117,148 6,73 PISTOLET

U niektórych gatunków dwa dodatkowe aminokwasy są kodowane przez kodony , które zwykle interpretuje się jako kodony stop :

Aminokwasy 21. i 22. 3-literowy 1-literowy Masa cząsteczkowa
Selenocysteina Sec U 168.064
Pirolizyna Pyl O 255.313

Oprócz konkretnych kodów aminokwasowych, w przypadkach, gdy analiza chemiczna lub krystalograficzna peptydu lub białka nie może jednoznacznie określić tożsamości reszty, stosuje się symbole zastępcze. Są one również używane do podsumowania konserwatywnych motywów sekwencji białkowych . Użycie pojedynczych liter do wskazania zestawów podobnych reszt jest podobne do użycia kodów skrótów dla zdegenerowanych zasad .

Aminokwasy niejednoznaczne 3-literowy 1-literowy Zawiera aminokwasy Zawiera kodony
Dowolny / nieznany Xaa X Wszystko NNN
Asparagina lub asparaginian Asx B D, N PROMIEŃ
Glutamina lub glutaminian Glx Z E, Q SAR
Leucyna lub izoleucyna Xle J ja, L YTR, ATH, CTY
Hydrofobowy Φ V, I, L, F, W, Y, M NTN, TAY, TGG
Aromatyczny Ω F, W, Y, H YWY, ​​TTY, TGG
Alifatyczny (niearomatyczny) Ψ V, I, L, M VTN, TTR
Mały π P, G, A, S BCN, RGY, GGR
hydrofilowy ζ S, T, H, N, Q, E, D, K, R VAN, WCN, CGN, AGY
Pozytywnie naładowany + K, R, H ARR, CRY, CGR
Naładowany ujemnie D, E GAN

Unk jest czasami używany zamiast Xaa , ale jest mniej standardowy.

Ter lub * (od terminacji) stosuje się w notacji dla mutacji w białkach, gdy występuje kodon stop. W ogóle nie odpowiada żadnemu aminokwasowi.

Ponadto wiele niestandardowych aminokwasów ma specyficzny kod. Na przykład, kilka leków peptydowych, takich jak Bortezomib i MG132 , jest sztucznie syntetyzowanych i zachowuje swoje grupy ochronne , które mają specyficzne kody. Bortezomib to Pyz –Phe–boroLeu, a MG132 to Z –Leu–Leu–Leu–al. Aby pomóc w analizie struktury białka, dostępne są fotoreaktywne analogi aminokwasów . Należą do nich fotoleucyna ( pLeu ) i fotometionina ( pMet ).

Występowanie i funkcje w biochemii

Białko przedstawione jako długi nierozgałęziony ciąg połączonych kół, z których każdy reprezentuje aminokwasy
Polipeptyd to nierozgałęziony łańcuch aminokwasów
Schematyczne porównanie struktur β-alaniny i α-alaniny
β-Alanina i jej izomer α-alaniny
Schemat przedstawiający strukturę selenocysteiny
Selenocysteina aminokwasowa

Aminokwasy, które mają grupę aminową przyłączoną do (alfa-) atomu węgla obok grupy karboksylowej, mają pierwszorzędne znaczenie w organizmach żywych, ponieważ uczestniczą w syntezie białek. Są one znane jako 2- , alfa- lub α-aminokwasy ( w większości przypadków wzór ogólny H2NCHRCOOH , gdzie R oznacza podstawnik organiczny znany jako „ łańcuch boczny ”); często termin „aminokwas” jest używany w odniesieniu do nich konkretnie. Obejmują one 22 proteinogenne („budujące białka”) aminokwasy, które łączą się w łańcuchy peptydowe („polipeptydy”), tworząc bloki budulcowe szerokiej gamy białek. Są to wszystkie L - stereoizomery („lewoskrętne” enancjomery ), chociaż kilka D -aminokwasów („prawoskrętnych”) występuje w otoczkach bakteryjnych , jako neuromodulator ( D - seryna ) oraz w niektórych antybiotykach .

Wiele aminokwasów proteinogennych i nieproteinogennych pełni funkcje biologiczne. Na przykład, w ludzkim mózgu glutaminian (standardowy kwas glutaminowy ) i kwas gamma-aminomasłowy („GABA”, niestandardowy gamma-aminokwas) są, odpowiednio, głównymi neuroprzekaźnikami pobudzającymi i hamującymi . Hydroksyprolina , główny składnik kolagenu tkanki łącznej , jest syntetyzowana z proliny . Glicyna jest biosyntetycznym prekursorem porfiryn stosowanych w czerwonych krwinkach . Karnityna jest wykorzystywana w transporcie lipidów . Dziewięć aminokwasów proteinogennych określa się mianem „ niezbędnych ” dla człowieka, ponieważ organizm ludzki nie może ich wytwarzać z innych związków , dlatego należy je spożywać jako pożywienie. Inne mogą być warunkowo niezbędne w pewnym wieku lub schorzeniach. Niezbędne aminokwasy mogą również różnić się w zależności od gatunku . Ze względu na swoje znaczenie biologiczne aminokwasy są ważne w żywieniu i są powszechnie stosowane w suplementach diety , nawozach , paszach i technologii żywności . Zastosowania przemysłowe obejmują produkcję leków , biodegradowalnych tworzyw sztucznych i chiralnych katalizatorów .

Aminokwasy proteinogenne

Aminokwasy są prekursorami białek. Łączą się w reakcjach kondensacji, tworząc krótkie łańcuchy polimerowe zwane peptydami lub dłuższe łańcuchy zwane polipeptydami lub białkami. Łańcuchy te są liniowe i nierozgałęzione, a każda reszta aminokwasowa w łańcuchu jest przyłączona do dwóch sąsiednich aminokwasów. W Naturze proces tworzenia białek kodowanych przez materiał genetyczny DNA/RNA nazywa się translacją i obejmuje stopniowe dodawanie aminokwasów do rosnącego łańcucha białkowego przez rybozym zwany rybosomem . Kolejność dodawania aminokwasów odczytywana jest poprzez kod genetyczny z matrycy mRNA , która jest kopią RNA jednego z genów organizmu .

Dwadzieścia dwa aminokwasy są naturalnie włączane do polipeptydów i są nazywane aminokwasami proteinogennymi lub naturalnymi. Spośród nich 20 jest zakodowanych przez uniwersalny kod genetyczny. Pozostałe 2, selenocysteina i pirolizyna , są włączane do białek dzięki unikalnym mechanizmom syntetycznym. Selenocysteina jest włączana, gdy mRNA podlegające translacji zawiera element SECIS , co powoduje, że kodon UGA koduje selenocysteinę zamiast kodonu stop. Pirolizyna jest wykorzystywana przez niektóre archeony metanogenne w enzymach, które wykorzystują do produkcji metanu . Jest kodowany za pomocą kodonu UAG, który normalnie jest kodonem stop w innych organizmach. Po tym kodonie UAG następuje sekwencja w dół PYLIS .

Kilka niezależnych badań ewolucyjnych sugeruje, że Gly, Ala, Asp, Val, Ser, Pro, Glu, Leu, Thr mogą należeć do grupy aminokwasów, które stanowiły wczesny kod genetyczny, podczas gdy Cys, Met, Tyr, Trp, His, Phe może należeć do grupy aminokwasów, które stanowiły późniejsze dodatki kodu genetycznego.

Aminokwasy standardowe vs niestandardowe

20 aminokwasów kodowanych bezpośrednio przez kodony uniwersalnego kodu genetycznego to aminokwasy standardowe lub kanoniczne . Zmodyfikowana forma metioniny ( N -formylometionina ) jest często włączana w miejsce metioniny jako początkowy aminokwas białek w bakteriach, mitochondriach i chloroplastach. Inne aminokwasy nazywane są niestandardowymi lub niekanonicznymi . Większość niestandardowych aminokwasów jest również nieproteogenna (tj. nie mogą być inkorporowane do białek podczas translacji), ale dwa z nich są proteinogenne, ponieważ mogą być inkorporowane translacyjnie do białek, wykorzystując informacje niezakodowane w uniwersalnym kodzie genetycznym.

Dwa niestandardowe aminokwasy proteinogenne to selenocysteina (obecna u wielu nie-eukariontów, jak również u większości eukariontów, ale niekodowana bezpośrednio przez DNA) i pirolizyna (znajdująca się tylko w niektórych archeonach i co najmniej jednej bakterii ). Włączenie tych niestandardowych aminokwasów jest rzadkie. Na przykład, 25 ludzkich białek zawiera selenocysteinę w swojej strukturze pierwszorzędowej, a strukturalnie scharakteryzowane enzymy (selenoenzymy) wykorzystują selenocysteinę jako ugrupowanie katalityczne w swoich miejscach aktywnych. Pirolizyna i selenocysteina są kodowane przez warianty kodonów. Na przykład selenocysteina jest kodowana przez kodon stop i element SECIS .

N -formylometionina (która często jest początkowym aminokwasem białek w bakteriach, mitochondriach i chloroplastach ) jest ogólnie uważana za formę metioniny , a nie za oddzielny aminokwas białkogenny. Kombinacje kodon- tRNA nie występujące w naturze mogą być również wykorzystywane do „rozszerzania” kodu genetycznego i tworzenia nowych białek znanych jako alloproteiny zawierające aminokwasy nieproteogenne .

Aminokwasy nieproteogenne

Oprócz 22 aminokwasów proteinogennych znanych jest wiele aminokwasów nieproteogennych . Nie występują one w białkach (na przykład karnityna , GABA , lewotyroksyna ) lub nie są wytwarzane bezpośrednio i w izolacji przez standardowe mechanizmy komórkowe (na przykład hydroksyprolina i selenometionina ).

Aminokwasy nieproteogenne występujące w białkach powstają w wyniku modyfikacji potranslacyjnej , czyli modyfikacji po translacji podczas syntezy białek. Te modyfikacje są często niezbędne dla funkcji lub regulacji białka. Na przykład karboksylacja glutaminianu pozwala na lepsze wiązanie kationów wapnia , a kolagen zawiera hydroksyprolinę, generowaną przez hydroksylację proliny . Innym przykładem jest tworzenie hypusyny w czynniku inicjacji translacji EIF5A , poprzez modyfikację reszty lizyny. Takie modyfikacje mogą również determinować lokalizację białka, np. dodanie długich grup hydrofobowych może spowodować wiązanie białka z błoną fosfolipidową .

Niektóre aminokwasy nieproteogenne nie znajdują się w białkach. Przykłady obejmują kwas 2-aminoizomasłowy i neuroprzekaźnik kwas gamma-aminomasłowy . Aminokwasy nieproteogenne często występują jako związki pośrednie w szlakach metabolicznych standardowych aminokwasów – na przykład ornityna i cytrulina występują w cyklu mocznikowym , będącym częścią katabolizmu aminokwasów (patrz poniżej). Rzadkim wyjątkiem od dominacji α-aminokwasów w biologii jest β-aminokwas beta alanina (kwas 3-aminopropanowy), który jest wykorzystywany w roślinach i mikroorganizmach w syntezie kwasu pantotenowego (witaminy B 5 ), składnika koenzym A .

W żywieniu człowieka

Schemat przedstawiający względne występowanie aminokwasów w surowicy krwi uzyskane z różnych diet.
Udział aminokwasów w różnych dietach ludzi i wynikająca z tego mieszanka aminokwasów w ludzkiej surowicy krwi. Glutaminian i glutamina są najczęstsze w żywności w ponad 10%, podczas gdy alanina, glutamina i glicyna występują najczęściej we krwi.

Po wchłonięciu do organizmu ludzkiego z pożywienia, 20 standardowych aminokwasów jest albo używanych do syntezy białek, innych biocząsteczek, albo utleniane do mocznika i dwutlenku węgla jako źródła energii. Szlak utleniania rozpoczyna się od usunięcia grupy aminowej przez transaminazę ; grupa aminowa jest następnie wprowadzana do cyklu mocznikowego . Innym produktem transamidacji jest ketokwas, który wchodzi w cykl kwasu cytrynowego . Aminokwasy glukogenne można również przekształcić w glukozę poprzez glukoneogenezę . Spośród 20 standardowych aminokwasów dziewięć ( His , Ile , Leu , Lys , Met , Phe , Thr , Trp i Val ) nazywa się aminokwasami egzogennymi, ponieważ organizm ludzki nie jest w stanie ich syntetyzować z innych związków na poziomie niezbędnym do prawidłowego wzrostu, więc muszą być pozyskiwane z pożywienia. Ponadto cysteina, tyrozyna i arginina są uważane za półniezbędne aminokwasy, a tauryna za półniezbędny kwas aminosulfonowy u dzieci. Szlaki metaboliczne syntetyzujące te monomery nie są w pełni rozwinięte. Wymagane ilości zależą również od wieku i stanu zdrowia danej osoby, dlatego trudno jest sformułować ogólne stwierdzenia na temat zapotrzebowania żywieniowego na niektóre aminokwasy. Ekspozycja dietetyczna na niestandardowy aminokwas BMAA została powiązana z ludzkimi chorobami neurodegeneracyjnymi, w tym ALS .

Sygnalizacja schemat kaskadowy
Schemat molekularnych kaskad sygnałowych , które biorą udział w syntezie białek mięśniowych miofibrylarnych i biogenezie mitochondriów w odpowiedzi na wysiłek fizyczny i określone aminokwasy lub ich pochodne (głównie L - leucyna i HMB ). Wiele aminokwasów pochodzących z białka spożywczego promuje aktywację mTORC1 i zwiększa syntezę białek poprzez przekazywanie sygnałów przez Rag GTPazy .
Skróty i reprezentacje:
 • PLD: fosfolipaza D
 • PA: kwas fosfatydowy
 • mTOR: mechanistyczny cel rapamycyny
 • AMP: monofosforan adenozyny
 • ATP: trifosforan adenozyny
 • AMPK: kinaza białkowa aktywowana przez AMP
 • PGC-1α: koaktywator gamma-1α receptora aktywowanego przez proliferatory peroksysomów
 • S6K1: kinaza p70S6
 • 4EBP1: eukariotyczny czynnik inicjacji translacji 4E białko 1
 • eIF4E: eukariotyczny czynnik inicjacji translacji 4E
 • RPS6: rybosomalne białko S6
 • eEF2: eukariotyczny czynnik wydłużania 2
 • RE: ćwiczenia oporowe; EE: ćwiczenie wytrzymałościowe
 • Myo: miofibrylarne ; Mito: mitochondrialne
 • AA: aminokwasy
 • HMB: kwas β-hydroksy β-metylomasłowy
 • ↑ oznacza aktywację
 • Τ oznacza hamowanie
Wykres syntezy białek mięśniowych w funkcji czasu
Trening oporowy stymuluje syntezę białek mięśniowych (MPS) przez okres do 48 godzin po treningu (pokazany jaśniejszą linią przerywaną). Spożycie posiłku bogatego w białko w dowolnym momencie w tym okresie zwiększy wywołany wysiłkiem wzrost syntezy białek mięśniowych (pokazany liniami ciągłymi).

Funkcje niebiałkowe

U ludzi aminokwasy niebiałkowe odgrywają również ważną rolę jako metaboliczne produkty pośrednie , takie jak w biosyntezie neuroprzekaźnika kwasu gamma-aminomasłowego (GABA). Wiele aminokwasów jest wykorzystywanych do syntezy innych cząsteczek, na przykład:

Niektóre niestandardowe aminokwasy są stosowane w roślinach jako obrona przed roślinożercami . Na przykład kanavanina jest analogiem argininy , która znajduje się w wielu roślinach strączkowych , a szczególnie w dużych ilościach w Canavalia gladiata (fasola mieczowa). Aminokwas ten chroni rośliny przed drapieżnikami, takimi jak owady i może powodować choroby u ludzi, jeśli niektóre rodzaje roślin strączkowych są spożywane bez przetwarzania. Mimozyna niebiałkowa występuje w innych gatunkach roślin strączkowych, w szczególności Leucaena leucocephala . Związek ten jest analogiem tyrozyny i może zatruwać zwierzęta pasące się na tych roślinach.

Zastosowania w przemyśle

Aminokwasy znajdują szerokie zastosowanie w przemyśle, ale ich głównym zastosowaniem jest dodatek do pasz zwierzęcych . Jest to konieczne, ponieważ wiele składników masowych tych pasz, takich jak soja , ma niski poziom lub brakuje niektórych niezbędnych aminokwasów : lizyny, metioniny, treoniny i tryptofanu, które są najważniejsze w produkcji tych pasz. W tej branży aminokwasy są również wykorzystywane do chelatowania kationów metali w celu poprawy wchłaniania minerałów z suplementów, co może być wymagane do poprawy zdrowia lub produktywności tych zwierząt.

Przemysł spożywczy jest także głównym konsumentem aminokwasów, w szczególności kwasu glutaminowego , który jest używany jako wzmacniacz smaku , oraz aspartamu (ester 1-metylowy aspartylofenyloalaniny) jako niskokaloryczny sztuczny słodzik . Podobna technologia do tej stosowanej w żywieniu zwierząt jest stosowana w przemyśle żywienia ludzi w celu złagodzenia objawów niedoboru minerałów, takich jak anemia, poprzez poprawę wchłaniania minerałów i zmniejszenie negatywnych skutków ubocznych suplementacji nieorganicznymi minerałami.

Zdolność chelatującą aminokwasów została wykorzystana w nawozach dla rolnictwa w celu ułatwienia dostarczania roślinom minerałów w celu uzupełnienia niedoborów minerałów, takich jak chloroza żelaza. Nawozy te są również stosowane w celu zapobiegania występowaniu niedoborów i poprawy ogólnego stanu zdrowia roślin. Pozostała produkcja aminokwasów wykorzystywana jest w syntezie leków i kosmetyków .

Podobnie niektóre pochodne aminokwasów są wykorzystywane w przemyśle farmaceutycznym. Należą do nich 5-HTP (5-hydroksytryptofan) stosowany do eksperymentalnego leczenia depresji, L -DOPA ( L - dihydroksyfenyloalanina) do leczenia choroby Parkinsona oraz lek eflornityna hamujący dekarboksylazę ornityny stosowany w leczeniu śpiączki .

Rozszerzony kod genetyczny

Od 2001 r. do białka dodano 40 nienaturalnych aminokwasów, tworząc unikalny kodon (kodowanie) i odpowiednią parę transfer-RNA:aminoacylo-syntetaza tRNA, aby zakodować je o różnych właściwościach fizykochemicznych i biologicznych w celu wykorzystania jako narzędzie do badania struktury i funkcji białek lub do tworzenia nowych lub ulepszonych białek.

Nullomery

Nullomery to kodony, które teoretycznie kodują aminokwas, jednak w naturze istnieje selektywna skłonność do stosowania tego kodonu na korzyść innego, na przykład bakterie wolą używać CGA zamiast AGA do kodowania argininy. Tworzy to pewne sekwencje, które nie pojawiają się w genomie. Ta cecha może zostać wykorzystana i wykorzystana do tworzenia nowych selektywnych leków do walki z rakiem i zapobiegania zanieczyszczeniu krzyżowemu próbek DNA pochodzących z dochodzeń na miejscu przestępstwa.

Chemiczne bloki budulcowe

Aminokwasy są ważne jako tanie surowce . Związki te są wykorzystywane w syntezie puli chiralnej jako enancjomerycznie czyste elementy budulcowe.

Aminokwasy badano jako prekursory chiralnych katalizatorów, na przykład w asymetrycznych reakcjach uwodorniania , chociaż nie istnieją żadne komercyjne zastosowania.

Tworzywa biodegradowalne

Aminokwasy zostały uznane za składniki polimerów biodegradowalnych, które znajdują zastosowanie jako opakowania przyjazne dla środowiska oraz w medycynie w dostarczaniu leków i budowie implantów protetycznych . Interesującym przykładem takich materiałów jest poliasparaginian , rozpuszczalny w wodzie biodegradowalny polimer, który może znaleźć zastosowanie w pieluchach jednorazowych i rolnictwie. Ze względu na swoją rozpuszczalność i zdolność do chelatowania jonów metali, poliasparaginian jest również stosowany jako biodegradowalny środek zapobiegający osadzaniu się kamienia i inhibitor korozji . Ponadto, aromatyczny aminokwas tyrozyna został uznany za możliwy zamiennik fenoli , takich jak bisfenol A , w produkcji poliwęglanów .

Synteza

Aby zapoznać się z etapami reakcji, zobacz tekst.
Synteza aminokwasów Strecker

Synteza chemiczna

Komercyjna produkcja aminokwasów zwykle opiera się na zmutowanych bakteriach, które nadprodukują poszczególne aminokwasy, wykorzystując glukozę jako źródło węgla. Niektóre aminokwasy powstają w wyniku enzymatycznej konwersji syntetycznych półproduktów. Kwas 2-aminotiazolino-4-karboksylowy jest półproduktem w jednej przemysłowej syntezie na przykład L -cysteiny . Kwas asparaginowy jest wytwarzany przez dodanie amoniaku do fumaranu za pomocą liazy.

Biosynteza

W roślinach azot jest najpierw asymilowany do związków organicznych w postaci glutaminianu , powstającego z alfa-ketoglutaranu i amoniaku w mitochondrium. W przypadku innych aminokwasów rośliny wykorzystują transaminazy , aby przenieść grupę aminową z glutaminianu do innego alfa-ketokwasu. Na przykład aminotransferaza asparaginianowa przekształca glutaminian i szczawiooctan w alfa-ketoglutaran i asparaginian. Inne organizmy również wykorzystują transaminazy do syntezy aminokwasów.

Niestandardowe aminokwasy są zwykle tworzone przez modyfikacje standardowych aminokwasów. Na przykład homocysteina powstaje na drodze transsulfuracji lub przez demetylację metioniny przez pośredni metabolit S -adenozylometioninę , podczas gdy hydroksyprolinę powstaje w wyniku posttranslacyjnej modyfikacji proliny .

Mikroorganizmy i rośliny syntetyzują wiele niezwykłych aminokwasów. Na przykład niektóre drobnoustroje wytwarzają kwas 2-aminoizomasłowy i lantioninę , która jest pochodną alaniny z mostkiem siarczkowym. Oba te aminokwasy znajdują się w peptydowych lantybiotykach , takich jak alametycyna . Jednak w roślinach kwas 1-aminocyklopropano-1-karboksylowy jest małym dwupodstawionym aminokwasem cyklicznym, który jest produktem pośrednim w produkcji hormonu roślinnego etylenu .

Reakcje

Aminokwasy podlegają reakcjom oczekiwanym od składowych grup funkcyjnych.

Tworzenie wiązania peptydowego

Obok siebie pokazano dwa aminokwasy.  Jeden traci wodór i tlen ze swojej grupy karboksylowej (COOH), a drugi traci wodór ze swojej grupy aminowej (NH2).  W wyniku tej reakcji powstaje cząsteczka wody (H2O) i dwa aminokwasy połączone wiązaniem peptydowym (–CO–NH–).  Dwa połączone aminokwasy nazywane są dipeptydem.
Kondensacja dwóch aminokwasów do dipeptydu . Dwie reszty aminokwasowe są połączone wiązaniem peptydowym

Ponieważ zarówno grupy aminowe, jak i kwasy karboksylowe aminokwasów mogą reagować, tworząc wiązania amidowe, jedna cząsteczka aminokwasu może reagować z inną i łączyć się przez wiązanie amidowe. Ta polimeryzacja aminokwasów tworzy białka. Ta reakcja kondensacji daje nowo utworzone wiązanie peptydowe i cząsteczkę wody. W komórkach ta reakcja nie zachodzi bezpośrednio; zamiast tego aminokwas jest najpierw aktywowany przez przyłączenie do przenoszącej cząsteczki RNA przez wiązanie estrowe . Ten aminoacylo-tRNA jest wytwarzany w zależnej od ATP reakcji prowadzonej przez syntetazę aminoacylo-tRNA . Ten aminoacylo-tRNA jest następnie substratem dla rybosomu, który katalizuje atak grupy aminowej wydłużającego się łańcucha białkowego na wiązanie estrowe. W wyniku tego mechanizmu wszystkie białka wytwarzane przez rybosomy są syntetyzowane zaczynając od ich N -końca i przesuwając się w kierunku ich C- końca.

Jednak nie wszystkie wiązania peptydowe powstają w ten sposób. W kilku przypadkach peptydy są syntetyzowane przez określone enzymy. Na przykład glutation trójpeptydowy jest istotną częścią obrony komórek przed stresem oksydacyjnym. Peptyd ten jest syntetyzowany w dwóch etapach z wolnych aminokwasów. W pierwszym etapie syntetaza gamma-glutamylocysteinowa kondensuje cysteinę i glutaminian poprzez wiązanie peptydowe utworzone między karboksylem łańcucha bocznego glutaminianu (węgiel gamma tego łańcucha bocznego) a grupą aminową cysteiny. Ten dipeptyd jest następnie kondensowany z glicyną przez syntetazę glutationu z wytworzeniem glutationu.

W chemii peptydy są syntetyzowane w różnych reakcjach. Jedna z najczęściej stosowanych w syntezie peptydów w fazie stałej wykorzystuje aromatyczne pochodne oksymowe aminokwasów jako jednostki aktywowane. Są one dodawane kolejno do rosnącego łańcucha peptydowego, który jest przymocowany do stałego nośnika żywicy. Biblioteki peptydów są wykorzystywane w odkrywaniu leków poprzez wysokoprzepustowe badania przesiewowe .

Połączenie grup funkcyjnych pozwala aminokwasom być skutecznymi ligandami polikleszczowymi dla chelatów metal-aminokwasy. Wiele łańcuchów bocznych aminokwasów może również podlegać reakcjom chemicznym.

Katabolizm

Katabolizm aminokwasów proteinogennych. Aminokwasy można sklasyfikować zgodnie z właściwościami ich głównych produktów degradacji:
* Glukogenny , z produktami posiadającymi zdolność do tworzenia glukozy przez glukoneogenezę
* Ketogenny , z produktami nie posiadającymi zdolności do tworzenia glukozy. Produkty te mogą być nadal używane do ketogenezy lub syntezy lipidów .
* Aminokwasy katabolizowane do produktów glukogennych i ketogenicznych.

Degradacja aminokwasu często obejmuje deaminację poprzez przeniesienie jego grupy aminowej do alfa-ketoglutaranu, tworząc glutaminian . Proces ten obejmuje transaminazy, często takie same jak te stosowane w aminowaniu podczas syntezy. U wielu kręgowców grupa aminowa jest następnie usuwana w cyklu mocznikowym i wydalana w postaci mocznika . Jednak degradacja aminokwasów może zamiast tego wytwarzać kwas moczowy lub amoniak. Na przykład dehydrataza serynowa przekształca serynę w pirogronian i amoniak. Po usunięciu jednej lub więcej grup aminowych, pozostała część cząsteczki może być czasami użyta do syntezy nowych aminokwasów lub może być wykorzystana jako energia poprzez wejście w glikolizę lub cykl kwasu cytrynowego , jak wyszczególniono na obrazku po prawej.

Kompleksowanie

Aminokwasy są ligandami dwukleszczowymi, tworzącymi kompleksy z aminokwasami metali przejściowych .

AAcomplexation.png

Analiza chemiczna

Całkowita zawartość azotu w materii organicznej jest tworzona głównie przez grupy aminowe w białkach. Całkowity azot Kjeldahla ( TKN ) jest miarą azotu szeroko stosowaną w analizie (ścieków) wody, gleby, żywności, paszy i ogólnie materii organicznej. Jak sama nazwa wskazuje, stosowana jest metoda Kjeldahla . Dostępne są bardziej czułe metody.

Zobacz też

Uwagi

Bibliografia

Dalsza lektura

Zewnętrzne linki